Определение лейкоцитов в крови. Лейкоциты. Повышенные и пониженные лимфоциты в лейкоцитарной формуле
5.
Необходимо для работы:
Проведение работы:
Цель работы:
Необходимо для работы:
Проведение работы:
не взбалтывать
· отсутствует гемолиз;
· частичный гемолиз;
· полный гемолиз.
Определение полей зрения.
Определение остроты зрения.
16. Дыхательные объемы и емкости. Методика определения ЖЕЛ. Спирография и спирометрия.
Применение миографии
· В психофизиологии для изучения возрастных закономерностей.
· В медицине для диагностики поражений периферической и центральной нервной системы.
· В физиологии труда и спорта.
· При изучении двигательной функции животных и человека.
· В исследованиях высшей нервной деятельности.
· В инженерной психологии (например, при исследовании утомления, выработки двигательного навыка).
· Для оценки при восстановлении нарушенной двигательной функции в ортопедии и протезировании.
Таблица 36
Затраты на основной обмен здоровых людей в зависимости от возраста и пола
Разница между показателями должного основного обмена, рассчитанными разными методами, обычно не превышает 10 %.
Термометрия.
Температура тела - важный показатель состояния здоровья человека. Нормальной температурой тела для взрослых в состоянии бодрствования и физиологического покоя (при измерении в подмышечной впадине) считается температура от 36°С до 36,9°С. Однако следует учитывать, что во время сна с 3 до 5 ч утра температура тела может достигать минимальных значений - 35,1–36,0°С. Таким образом, норма температуры тела при измерении в подмышечной впадине составляет 36±0,9°С (35,1 - 36,9°С). Температура 37°С и выше рассматривается как повышенная (гипертермия ), а 35°С и ниже – как пониженная (гипотермия ). При измерении в глубоких областях тела (прямой кишке, пищеводе) ее нормальные значения на 0,5°С выше, чем в подмышечной ямке.
Цель работы - определение минимального времени, необходимого для точного измерения аксиллярной температуры ртутными или электронными медицинскими термометрами в подмышечной впадине.
Материалы и оборудование: максимальный ртутный термометр, секундомер, 70 % спирт, вата.
Ход работы. Кожа подмышечной ямки должна быть сухой, так как при влажной коже термометр будет показывать более низкие значения температур из-за испарения влаги с поверхности ртутного резервуара. Обследуемый должен удерживать термометр в течение всего времени измерения, плотно прижав плечо к туловищу. Во время измерения температуры человек должен находиться в состоянии бодрствования и полного покоя.
Осмотрите медицинский термометр, убедитесь в его целости и протрите спиртом. Встряхните термометр до температуры 35°С. Поместите термометр в подмышечную впадину. Запишите показания термометра через 3, 5, 8, 10, 15 мин. Затем проведите термометрию с помощью электронного термометра, записывая показания шкалы прибора через 30 с, 1, 2, 3, 5, 8, 10, 15 мин. При выполнении работы необходимо следить, чтобы головка ртутного и кончик датчика электрического термометров удерживались по среднеаксиллярной линии.
По результатам опытов постройте графики показаний ртутного и электронного термометров в зависимости от времени измерения температуры.
Вывод: у испытуемого температура тела, измеренная в подмышечной впадине _____, длительность ее измерения ртутным должна быть не менее ___ мин.
21. Методика образования условных рефлексов.
Для образования условного рефлекса требуются определенные условия. Условным раздражителем, или сигналом, может быть любое изменение, возникшее во внешней среде или внутри организма. На каждый условный раздражитель (зажигание лампочки, музыкальные звуки, шумы, давление на поверхность кожи, прикосновение, чесание, укол, запах и т.п.) может быть выработан условный рефлекс.
Для образования условного рефлекса на условный (безразличный) раздражитель надо, чтобы этот условный сигнал предшествовал безусловному и в течение некоторого времени действия последнего сопровождал его. Например, звонок (условный сигнал) должен начать звенеть на 5–30 с раньше, чем собака получит корм (безусловный стимул), и некоторое время сопровождать еду. Для того, чтобы выработался условный рефлекс, надо несколько раз повторять такое сочетание.
Если сочетать условный раздражитель с пищевым подкреплением, то вскоре на этот, ранее безразличный раздражитель, образуется условный рефлекс. Один и тот же сигнал может стать раздражителем при выработке разных условных рефлексов. В одном случае звонок может вызвать слюноотделение, а в другом – оборонительный рефлекс и т.д. Это объясняется тем, что характер условного рефлекса определяется подкрепляющим безусловным рефлексом, т.е. условные рефлексы образуются на основе безусловных.
И.П. Павлов разработал методику образования условных рефлексов. Собаку помещают в специальную камеру, полностью изолированную от окружающего мира (никакие раздражители из внешней среды не должны проникать в камеру). Вне камеры находится и сам экспериментатор. При помощи специальной аппаратуры создаются разнообразные раздражители, выдается пищевое подкрепление, регистрируется слюноотделение и т.д. Вначале И.П. Павлов построил полностью изолированную камеру, однако позже выяснилось, что такая абсолютная изоляция не обязательна.
Таким образом, для образования условных рефлексов необходимы следующие специальные условия.
1. Наличие двух раздражителей: индифферентного (безразличного), который хотят сделать условным, и безусловного, вызывающего какую-либо деятельность организма, например отделение слюны, отдергивание лапы и т.п.
2. Индифферентный раздражитель (свет, звук и т.п.) должен предшествовать безусловному и некоторое время сопровождать действие последнего.
3. Безусловный раздражитель должен быть сильнее условного: для сытой собаки с низкой возбудимостью пищевого центра звонок не станет условным пищевым раздражителем.
4. Отсутствие отвлекающих посторонних раздражителей.
5. Активное состояние коры. Это верно и для человека. Если лекция не интересна и развивается полудремотное состояние, то материал не запоминается. Живая эмоциональная лекция с интересными примерами запоминается хорошо.
Электроэнцефалограмма (ЭЭГ) как метод регистрации электрических явлений в коре больших полушарий. Классификация ритмов ЭЭГ.
Электроэнцефалография (ЭЭГ) представляет собой метод регистрации биоэлектрической активности головного мозга, производимой через неповрежденные покровы головы.
Электрокортикография (ЭКоГ) - регистрация ведется с наложением электродов непосредственно на поверхность мозга. Введение электродов в глубокие отделы мозга позволяет провести электросубкортикографию (ЭСКоГ).
Краткая характеристика ЭЭГ здорового человека . В большинстве случаев у здорового бодрствующего человека, находящегося в положении лежа с закрытыми глазами или в темноте, регистрируются относительно регулярные, близкие к синусоидальным колебания биопотенциалов мозга, которые являются результатом множества электрических процессов в различных образованиях его, слагающихся в сложную волнообразную кривую, к которой условно применяют понятие о частоте, амплитуде, фазовых состояниях.
Особенно высокие и устойчивые кривые регистрируются в теменно-затылочной области, одиночные или групповые - в других отделах мозга. Эти кривые Н. Berger (1929) назвал альфа-ритмом; их напряжение при записи через электроды, расположенные на коже, колеблется в пределах 50-100 мкВ (в среднем 40 - 50 мкВ), продолжительность 60-140 мс и частота 8-13 колебаний в секунду. Редко они сохраняют устойчивость, амплитуда волн то убывает, го увеличивается, давая рисунок «веретен», «вздутий», «биений». Альфа-ритм преобладает на ЭЭГ здоровых взрослых людей в 70% случаев, у остальных выражен слабо или отсутствует (до 10% случаев). В передних отделах мозга, а также при подавлении альфа-активности внешними раздражениями выявляются бета-волны. Частота их в среднем равна 25 колебаниям в секунду и изменяется от 15 до 30 колебаний в секунду; волны большей частоты называются гамма-волнами.
Амплитуда бета-волн в 3-4 раза ниже, чем альфа-волн, и в некоторых записях эти колебания почти не различаются. Ткани, покрывающие мозг, оказывают большое электросопротивление (5*103-15*103 Ом) и снижают биопотенциалы в 5-10 раз, причем амплитуда быстрых колебаний уменьшается быстрее по сравнению с медленными волнами.
Основы классификации ритмов электроэнцефалограммы (ЭЭГ):
Традиционная ЭЭГ (диапазон частот 0,5-100 Гц):
Гамма-ритм (частота более 40 Гц, амплитуда менее 15 мкВ);
Бета-ритм (частота 14-40 Гц, амплитуда менее 25 мкВ);
Альфа-ритм (частота 8-13 Гц, амплитуда 10-150 мкВ);
Тета-ритм (частота 4-7 Гц, амплитуда 75-150 мкВ);
Дельта-ритм (частота 0,5-3 Гц, амплитуда свыше 100 мкВ).
Сверхмедленная биоэлектрическая активность
(диапазон частот менее 0,5Гц):
Секундные или дзета-волны (частота 0,1-0,5 Гц, период от 2 до 10 секунд, амплитуда менее десятки и сотни мкВ);
Многосекундные или тау-волны (частота 0,0167-0,1 Гц, период от 10 до 60 секунд, амплитуда сотни мкВ)
Минутные и многоминутные или эпсилон-волны (частота менее 0,0167 Гц, период от 1 минуты и более, амплитуда сотни мкВ, единицы и десятки мВ)
Относительно постоянный потенциал милливольтового диапазона или омега-потенциал (устойчив в течение часов, амплитуда ± 110 мВ)
Рецепторы, их классификация: по локализации (мембранные, ядерные), механизму развития процессов (ионо- и метаьотропные), по скорости приема сигнала (быстрые, медленные), по роду вопринимающих веществ.
Рецепторы представляют собой конечные специализированные образования, предназначенные для трансформации энергии различных видов раздражителей в специфическую активность нервной системы.
Классификация:
по локализации
· мембранные
· ядерные
по механизму развития процессов
· ионотропные (представляют собой мембранные каналы, открываемые или закрываемые при связывании с лигандом. Возникающие при этом ионные токи вызывают изменения трансмембранной разности потенциалов и, вследствие этого, возбудимости клетки, а также меняют внутриклеточные концентрации ионов, что может вторично приводитъ к активации систем внутриклеточных посредников. Одним из наиболее полно изученных ионотропных рецепторов является н-холинорецептор.)
· метаботропные (связаны с системами внутриклеточных посредников. Изменения их конформации при связывании с лигандом приводит к запуску каскада биохимических реакций, и, в конечном счете, изменению функционального состояния клетки.)
по скорости приема сигнала
· быстрые
· медленные
по роду вопринимающих веществ
· Хеморецепторы - воспринимают воздействие растворенных или летучих химических веществ.
· Осморецепторы - воспринимают изменения осмотической концентрации жидкости (как правило, внутренней среды).
· Механорецепторы - воспринимают механические стимулы (прикосновение, давление, растяжение, колебания воды или воздуха и т. п.)
· Фоторецепторы - воспринимают видимый и ультрафиолетовый свет
· Терморецепторы - воспринимают понижение (холодовые) или повышение (тепловые) температуры
· Барорецепторы – воспринимают изменение давления
3. Ионотропные рецепторы, метаботпропные рецепторы и их разновидности. Системы вторичных посредников действия метаботропных рецепторов (цАМФ, цГМФ, инозитол-3-фосфат, диацилглицерол, ионы Са++).
На постсинаптической мембране выделяют два типа рецепторов - ионотропные и метаботропные.
Ионотропнный
В случае ионотропного рецептора
чувствительная молекула содержит не только активный центр для связывания медиатора, но также ионный канал. Воздействие «первичного посредника» (медиатора) на рецептор приводит к быстрому открыванию канала и развитию постсинаптического потенциала.
Метаботропный
При присоединении медиатора, и возбуждении метаботропного рецептора изменяется внутриклеточный метаболизм, т.е. течение биохимических реакций
С внутренней стороны мембраны к такому рецептору присоединен целый ряд других белков, выполняющих ферментативные и частью передающие («посреднические») функции (рис.). Белки-посредники относятся к G-белкам. Под влиянием возбужденного рецептора G-белок воздействует на белок-фермент, обычно переводя его в «рабочее» состояние. В результате запускается химическая реакция: молекула-предшественник превращается в сигнальную молекулу - вторичный посредник.
Рис. Схема строения и функционирования метаботропного рецептора: 1 - медиатор; 2 - рецептор; 3 - ионный канал; 4 - вторичный посредник; 5 - фермент; 6 - G-белок; → - направление передачи сигнала
Вторичные посредники - это мелкие, способные к быстрому перемещению молекулы или ионы, передающие сигнал внутри клетки. Этим они отличаются от «первичных посредников» - медиаторов и гормонов, передающих информацию от клетки к клетке.
Наиболее известным вторичным посредником является цАМФ (циклическая аденозинмонофосфорная кислота), образуемая из АТФ с помощью фермента аденилатциклазы. Похожа на него цГМФ (гуанозинмонофосфорная кислота). Другими важнейшими вторичными посредниками являются инозитолтрифосфат и диацилглицерол, образуемые из компонентов клеточной мембраны под действием фермента фосфолипазы С. Чрезвычайно велика роль Ca 2+ , входящего в клетку снаружи через ионные каналы или высвобождающегося из особых мест хранения внутри клетки («депо» кальция). В последнее время много внимания уделяется вторичному посреднику NO (оксиду азота), который способен передавать сигнал не только внутри клетки, но и между клетками, легко преодолевая мембрану, в том числе от постсинаптического нейрона к пресинаптическому.
Заключительный шаг в проведении химического сигнала - воздействие вторичного посредника на хемочувствительный ионный канал. Это воздействие протекает либо непосредственно, либо через дополнительные промежуточные звенья (ферменты). В любом случае происходит открытие ионного канала и развитие ВПСП либо ТПСП. Продолжительность и амплитуда их первой фазы будет определяться количеством вторичного посредника, которое зависит от количества выделившегося медиатора и длительности его взаимодействия с рецептором.
Таким образом, механизм передачи нервного стимула, используемый метаботропными рецепторами, включает в себя несколько последовательных этапов. На каждом из них возможна регуляция (ослабление либо усиление) сигнала, что делает реакцию постсинаптической клетки более гибкой и адаптированной к текущим условиям. Вместе с тем это же приводит к замедлению процесса передачи информации
Система цАМФ
Фосфолипаза С
Методика подсчета лейкоцитов в крови.
4. Методика определения количества гемоглобина в крови.
5.
Определение цветного показателя крови. Абсолютное содержание гемоглобина в эритроцитах.
6. Методика определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ).
7. Методика определения групп крови.
Определения свертывания крови по Сухареву.
Необходимо для работы: испытуемый, чистый и сухой капилляр от прибора Панченкова, стерильный скарификатор и пинцет, спирт, йод, вата.
Проведение работы:
1. Проколоть палец, снять первую каплю крови сухой ваткой.
2. Погрузить конец капилляра в каплю крови, не прижимая отверстия к пальцу.
3. Слегка опустив наружный конец капилляра, набрать 20-30 мм крови и перевести этот столбик крови на середину.
4. Держа капилляр двумя пальцами, произвести плавное покачивание его в обе стороны с амплитудой 40-45 0 .
Свободное смещение столбика крови говорит о том, что свертывание еще не наступило. Замедленное движение крови при наклоне капилляра характеризует начало свертывания, при этом на внутренней стенке капилляра появляются небольшие сгустки.
Момент полной остановки движения столбика крови в капилляре соответствует наступлению окончательного свертывания крови. По предлагаемой методике скорость свертывания крови в норме: начало свертывания происходи через 30 с - 2 мин., полное свертывание - через 3-5 мин.
9. Методика определения осмотической резистентности эритроцитов.
Цель работы: ознакомиться со свойствами осмотической устойчивости эритроцитов и произвести количественную оценку их резистентности по отношению к гипотоническим растворам.
Необходимо для работы: восемь чистых и сухих пробирок, штатив, мерный цилиндр на 5-10 мл, 1%-ный раствор хлористого натрия, дистиллированная вода, стерильные скарификаторы и пинцет, спирт, йод, вата, стеклянные палочки, мерные пипетки.
Проведение работы:
1. В каждую из пробирок налить 1%-ный раствор хлористого натрия в убывающем количестве от 0,6 до 0,15 мл, затем в каждую пробирку добавить дистиллированной воды до 1 мл. Пробирки пронумеровать.
2. Во все пробирки добавить с помощью капилляра Сали по капле крови. Добавление крови лучше начинать с пробирки, в которую помещен раствор с наименьшей концентрацией, и идти в сторону увеличения. Осторожно перемешать содержимое, чтобы не образовались пузырьки воздуха.
3. Оставить пробирки в штативе на хорошо освещенном месте на 30-40 мин, после чего рассмотреть их содержимое (не взбалтывать !). Проанализировать результаты.
4. О границах (уровне) осмотической резистентности эритроцитов судить по степени гемолиза крови в различных гипотонических растворах.
6. Отметить пробирки, в которых:
· отсутствует гемолиз;
· частичный гемолиз;
· полный гемолиз.
7. В выводах дать определение верхней и нижней границ резистентности эритроцитов и сделать заключение о соответствии полученных результатов физиологической норме.
Камера Горяева – это приспособление для измерения числа клеток и частиц в определённом объёме жидкости (кровь, моча), состоящее из специального толстого предметного и покровного стёкла.
Предметное стекло имеет углубленную площадку посередине, на которую нанесена сетка из 225 больших квадратов. Из этих квадратов 25 равномерно разделены на 16 меньших квадратов. Благодаря такому объёму сетки подсчёт выполняется точнее, нежели в других ручных счётных устройствах.
Камера ГоряеваОбслуживание камеры
После использования инструмента предметное стекло дезинфицируют путём погружения в 4% раствор формалина на час или в 70% раствор этилового спирта на полчаса. После этого камеру тщательно промывают дистиллированной водой. Излишек жидкости убирают мягкой салфеткой. Стоит обратить внимание на то, что камеру нельзя протирать ватным тампоном из-за цепляющихся к ней волокон. Хранится стекло в сухом месте.
Правило Егорова
Во время использования камеры в подсчитываются те ФЭ, которые располагаются внутри квадрата сетки и на верхней и левой линии его периметра. При этом частицы, касающиеся правой и нижней линии периметра во время расчёта данной клетки не включаются.
Определение лейкоцитов в крови
Методика подсчёта лейкоцитов
Подсчёт количества лейкоцитов начинается с разведения крови в 3-5% растворе этановой кислоты с метиловой синью в 20 раз. Рабочий материал перед применением протирают марлей насухо.
Покровное стекло нужно протереть до возникновения цветных колец Ньютона. Далее, камеру заполняют разведённой кровью, при этом первые две капли выпускают на фильтровальную бумагу. Жидкость попадает в камеру благодаря капиллярному свойству воды. Важно проследить, чтобы в желобки при заполнении ничего не затекало. Если это произошло, жидкость аккуратно убирают фильтровальной бумагой. Затем оставляют сетку в покое на минуту, ожидая, пока ФЭ остановят своё движение.
Подсчёт лейкоцитов осуществляется в пределах ста больших квадратов при малом увеличении, то есть при окуляре 10х и объективе 8х, по правилу Егорова. Полученная цифра используется в формуле.
Х = (n × 250 × 20) / 100 или Х = n × 50
Х – количество лейкоцитов.
n – число, полученное в результате подсчёта в камере.
Количество лейкоцитов определяют, принимая во внимание число больших квадратов сетки – 100 и разведение крови – 20.
Как происходит подсчет лейкоцитов
Норма лейкоцитов и отклонения
Норма лейкоцитов у людей составляет 4,0 – 9,0 × 10⁹/л. Или, по-другому, в 1 кубическом мм крови располагается примерно 6000 белых кровяных клеток.
На отклонения от нормы могут влиять внешние физиологические факторы:
- приём пищи перед сдачей крови;
- стресс;
- беременность или менструация у женщин;
- переохлаждение или перегрев;
Если количество белых кровяных клеток превышает 9,0 × 10⁹/л (повышены лейкоциты), такое состояние называется лейкоцитозом. Подобную картину можно увидеть при злокачественных заболеваниях крови, инфекциях, поражениях радиацией и отравлениях.
Лекарственные препараты тоже способны увеличить количество лейкоцитов. Некроз тканей, обильные кровотечения, в том числе в результате операций, почечная кома, болезни сердца – всё это может привести лейкоцитозу.
Падение количества лейкоцитов ниже 3,9 × 10⁹/л называется лейкопенией. Однако у некоторых людей фиксируется постоянное число лейкоцитов в количестве 3,5 × 10⁹/л. Принято считать, что у таких людей сохраняется резерв этих клеток в тканях в 50 раз больше, нежели в крови. Еще встречается функциональная лейкопения после введения анальгетиков, сульфаниламидов и других лекарственных препаратов, после долгой мышечной работы, в результате поражения инфекциями и вирусами (тиф, грипп, корь).
Лейкоцитарная формула
Все виды лейкоцитов составляют лейкоцитарную формулу. По ней можно выявить определённые патологии. Нормы формулы меняются в зависимости от возраста и периода жизни человека. Сдвиг хорошо заметен у женщин во время беременности или после родов.
Применяются разные способы подсчёта соотношения видов этих клеток, но все они связаны с тем, что более тяжелые клетки (базофилы, например) располагаются ближе к краю мазка, а лимфоциты, как легкие клетки, остаются в середине.
- Метод Филипченко. В данном способе подсчёт осуществляется по поперечной прямой границы одного конца к другому. Мазок при этом мысленно разделяют на три части.
- Метод Шиллинга. Лейкоциты подсчитывают в четырех участках мазка.
Полученные данные записываются в таблицу. Индивидуально количество каждого вида белых клеток крови высчитывается по формулам. Отмечаются те элементы, которые попали в поле зрения. Счёт ведётся до того, момента, пока сумма всех подсчитанных клеток не составит 100.
Методика подсчёта лейкоцитов в моче
В моче подсчитывается количество лейкоцитов в камере Горяева по Нечипоренко. Этот анализ нужен для мониторинга заболеваний почек. Периодическое исследование мочи помогает проследить за правильностью лечения и эффективностью назначенной терапии.
Сбор мочи
В изучение идёт только первая утренняя моча в середине мочеиспускания. Для пациента важно следовать основным правилам сбора этого биоматериала. Специальной дополнительной подготовки для исследования не требуется.
Методика расчета
10 мл свежесобранной мочи центрифугируют в течение трёх минут при 2,5 тыс. оборотов в минуту. Перед этим необходимо проследить, чтобы моча, во избежание частичного распада клеток, имела слабокислую реакцию.
При помощи пипетки с узким оттянутым концом убирают верхний слой. В пробирке оставляют от 0,5 мл мочи до 1 мл в зависимости от объёма осадка.
Осадок аккуратно перемешивают с надосадочной жидкостью. Полученным раствором заполняют счётную камеру Горяева по схожему принципу, что используется при подсчёте ФЭ крови. Камеру оставляют в покое от 3 до 5 минут.
Полученная цифра используется в формуле:
Х = (а/0,9) × (1000/V)
Х – число лейкоцитов в 1 мл мочи.
а – подсчитанное количество, делённое на объём камеры в 1 мкл осадка мочи.
v – Количество мочи, взятой для исследования.
1000 – количество осадка.
Это важно! Норма лейкоцитов: в 1 мл мочи не более 2 × 10³ белых кровяных клеток.
Еще:
Разновидности лейкоцитов в крови, в чем их важность для человека?
Оборудование и реактивы:
счетная камера;
микроскоп.
X = (А х 4000 х В)/Б,
Воспаление или некроз ткани.
Интоксикация.
Острые кровотечения.
Основные причины нейтропении.
Основные причины эозинофилии.
Аллергические заболевания.
Брюшной тиф.
Основные причины базофилии:
Основные причины моноцитоза.
Основные причины лимфоцитоза.
studfiles.net
Подсчет количества лейкоцитов крови может быть произведен в счетной камере Бюркера с сеткой Горяева или в электронно-автоматических анализаторах («Целлоскоп», «Культер», «Техникан»).
Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева
Принцип метода: аналогичен таковому подсчету эритроцитов, суть его состоит в точном отмеривании крови и ее разведении в определенном объеме жидкости с последующим подсчетом клеточных элементов в счетной камере и пересчете полученного результата на 1 крови.
Оборудование и реактивы:
смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов;
3% раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метилвиолета или метиленового синего;
счетная камера;
микроскоп.
Смеситель для лейкоцитов отличается от такового для эритроцитов тем, что имеет более широкий просвет капилляра и меньший по величине резервуар. На смеситель нанесены три метки: 0,5, 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в 10 либо в 20 раз (чаще разводят в 20 раз).
Ход исследования: при взятии крови для подсчета лейкоцитов с кожи предварительно удаляют ватным тампоном остатки крови и, слегка сдавливая палец, выпускают свежую каплю крови. При работе со смесителями кровь набирают до метки 0,5, затем разводят 3 % раствором уксусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в течение 3 мин, после чего сливают 1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками для подсчета лейкоцитов наливают 0,4 мл 3% раствора уксусной кисло ты и в нее выпускают 0,02 мл крови, отмеренной пипеткой от гемометра Сали. Тщательно встряхивают пробирки, затем в жидкость опускают пипетку и, набрав содержимое, заполняют счетную камеру. Так как лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов, то для получения достоверного и точного результата подсчет производят в 100 больших (неразграфленных) квадратах. Обычно в одном большом квадрате находится 1-2 лейкоцита. Число лейкоцитов в 1 мкл крови рассчитывается аналогично расчету числа эритроцитов по формуле
X = (А х 4000 х В)/Б,
где X - количество лейкоцитов в 1 мкл крови; А - количество лейкоцитов, сосчитанных в 1600 малых квадратах; Б - количество сосчитанных малых квадратов (1600); 4000 - величина, умножая на которую, мы получаем количество клеток в 1 мкл.
Интерпретация полученных данных. Нормальное количество лейкоцитов: 4.0 – 9.0 х 109/л. Уменьшение их числа в крови называется лейкопенией, увеличение - лейкоцитозом.
Лейкоцитоз может быть абсолютным (истинным) и относительным (перераспределительным).
Абсолютный лейкоцитоз – наблюдается при острых воспалительных процессах, некрозе тканей, острых бактериальных инфекциях (за исключением брюшного тифа, бруцеллеза, туляремии и др.), аллергических состояниях, злокачественных опухолях (с деструкцией тканей), закрытых травмах черепа и кровоизлияниях в мозг, диабетической и уремической коме, шоке, острой кровопотере, как первичная реакция – при лучевой болезни. Значительное повышение количество лейкоцитов встречается при лейкозах.
Относительный (перераспределительный) является следствием поступления лейкоцитов в ток крови из органов, служащих для нее депо. Это происходит после приема пищи (пищевой лейкоцитоз), горячих и холодных ванн, сильных эмоций (вегетососудистый лейкоцитоз), интенсивной мышечной работы (миогенный лейкоцитоз) и т.д.
Лейкопения. Лейкопения рассматривается как показатель угнетения функциональной способности костного мозга в результате воздействия токсических веществ (мышьяк, бензол и т.п.), некоторых медикаментов (сульфаниламиды, левомицетин, бутадион, иммуран, циклофосфан и т.п.), вирусов (гриппа, вирусного гепатита, кори и т.п.), микробов (брюшного тифа, бруцеллеза и т.п.), ионизирующей радиации, рентгеновского излучения и гиперспленизма (увеличение функции селезенки).
Лейкоцитоз и лейкопения редко характеризуются пропорциональным увеличением (снижением) суммарного числа лейкоцитов всех видов (например лейкоцитоз при сгущении крови); в большинстве случаев имеется увеличение (уменьшение) числа какого-либо одного типа клеток, поэтому применяют термины «нейтрофилез», «нейтропения», «лимфоцитоз», «лимфопения», «эозинофилия», «эозинопения», «моноцитоз», «моноцитопения», «базофилия».
При клинической оценке изменения количества лейкоцитов большое значение придается процентному соотношению отдельных форм лейкоцитов, то есть лейкоцитарной формуле.
Лейкоцитарная формула крови здорового человека:
Относительное количество Абсолютное количество
Базофилы……………………….0-1% 0-0,0650 х 109/л
Эозинофилы…………………….0.5-5% 0,02-0,30 х 109/л
Нейтрофилы: - миелоциты…………0% отсутствуют
Метамиелоциты……0% отсутствуют
Палочкоядерные…...1-6% 0,040-0,300 х 109/л
Сегментоядерные….47-72% 2,0-5,5 х 109/л
Лимфоциты……………………….19-37% 1,2-3,0 х 109/л
Моноциты………………………….3-11% 0,09-0,6 х 109/л
Подсчет лейкоцитарной формулы производят в окрашенных мазках периферической крови. Для правильной интерпрепатации результатов исследования лейкоцитарной формулы рекомендуется производить подсчет в абсолютных количествах, а не в относительных. Наиболее распространены методы окраски мазков по Романовскому-Гимзе, по Паппенгейму. Под иммерсией считают не менее 200 клеток, а затем выводят процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Анализ лейкограммы с учетом других показателей крови и клинической картины является ценным методом обследования, помогает в постановке диагноза и определении прогноза заболевания.
Основные причины нейтрофилеза.
Острые бактериальные инфекции – локализированные и генерализованные.
Воспаление или некроз ткани.
Миелопролиферативные заболевания.
Интоксикация.
Лекарственные воздействия (кортикостероиды).
Острые кровотечения.
Основные причины нейтропении.
Инфекции – бактериальные (брюшной тиф, бруцеллез, туляремия, паратифы) и вирусные (инфекционный гепатит, корь, грипп, краснуха и другие).
Миелотоксические влияния и супрессия гранулоцитопоэза (ионизирующая радиация; химические агенты – бензол, анилин, ДДТ; лекарственные воздействия – цитостатики и иммунодепрессанты; витамин-В12-фолиеводефицитная анемия, острый алейкемический лейкоз, апластическая анемия).
Воздействие антител (иммунные формы) – гиперчувтвительность к медикаментам, аутоиммунные заболевания (СКВ, ревматоидный артрит, хронический лимфолейкоз), изоиммунные проявления (гемолитическая болезнь новорожденных).
Перераспределение и депонирование в органах – шоковые состояния, заболевания со спленомегалией и гиперспленизмом.
Наследственные формы (семейная доброкачественная хроническая нейтропения).
Основные причины эозинофилии.
Аллергические заболевания.
Хронические поражения кожи - псориаз, пузырчатка, экзема.
Опухоли (эозинофильные варианты лейкоза).
Другие заболевания – фибропластический эндокардит Леффлера, скарлатина.
В фазе выздоровления при инфекциях и воспалительных заболеваниях (благоприятный прогностический признак).
Причины эозинопении (анэозинофилии).
Повышенная адренокортикостероидная активность в организме.
Брюшной тиф.
Основные причины базофилии:
Хронический миелолейкоз и эритремия.
Основные причины моноцитоза.
Подострые и хронические бактериальные инфекции.
Гемобластозы – моноцитарный лейкоз, лимфогранулематоз, лимфомы.
Другие состояния – СКВ, саркоидоз, ревматоидный артрит, инфекционный моноцитоз; в период выздоровления от инфекций, при выходе из агранулоцитоза, после спленэктомии.
Снижение числа моноцитов имеет значение главным образом при оценке лимфоцитарно-моноцитарного соотношения при легочном туберкулезе.
Основные причины лимфоцитоза.
Инфекции – острые вирусные (инфекционный мононуклеоз, корь, краснуха, ветряная оспа), хронические бактериальные (туберкулез, сифилис, бруцеллез), протозойные (токсоплазмоз).
Гемобластозы (лимфолейкоз, лимфомы).
Другие заболевания - гипертиреоз, аддисонова болезнь, витамин-В12-фолиево-дефицитная анемия, гипо- и апластические анемии.
Лимфоцитопения наблюдается при СКВ, лимфогранулематозе, распространенном туберкулезе лимфоузлов, в терминальной стадии почечной недостаточности, острой лучевой болезни, иммунодефицитных состояниях, приеме глюкокортикоидов.
Увеличение или уменьшение числа отдельных видов лейкоцитов в крови может быть относительным или абсолютным. Если изменяется только процентное содержание того или иного вида лейкоцитов, то имеет место относительная нейтрофилия, относительная эозинопения и т.д. Увеличение или уменьшение абсолютного содержания какого-либо вида лейкоцитов, то есть количества данных клеток в единице объема крови, называют абсолютной нейтрофилией, абсолютной эозинопенией и т.д.
Сдвиг формулы влево (увеличение количества молодых форм нейтрофилов) – признак воспаления или некротического процесса в организме.
Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо характерен для лучевой болезни и витамин-В12-фолиеводефицитной анемии.
Отсутствие или значительное снижение числа всех видов зернистых лейкоцитов – гранулоцитов (нейтрофилов, эозинофилов, базофилов) обозначают термином агранулоцитоз. В зависимости от механизма возникновения различают миелотоксический (воздействие ионизирующего излучения, прием цитостатиков) и иммунный (гаптеновый и аутоиммунный агранулоцитоз).
studfiles.net
Лейкоциты (leucocytus)
Количество лейкоцитов в крови зависит как от скорости их образования, так и от мобилизации их из костного мозга, а также от их утилизации и миграции в ткани (в очаги повреждения), захвата легкими и селезенкой. На эти процессы, в свою очередь, влияет ряд физиологических факторов, и поэтому число лейкоцитов в крови здорового человека подвержено колебаниям: оно повышается к концу дня, при физической нагрузке, эмоциональном напряжении, приеме белковой пищи, резкой смене температуры окружающей среды.
Лейкоциты подсчитываются с использованием камеры Горяева и с помощью автоматических счетчиков.
При пробирочном методе взятия крови для подсчета лейкоцитов:
- в пробирку наливают 0,4 мл раствора 3–5% уксусной кислоты, подкрашенной метиленовой синью. Капиллярной пипеткой набирают из свежей капли 20 мкл крови (разведение в 20 раз), осторожно выдувают ее в пробирку с реактивом и ополаскивают пипетку. Смесь хорошо перемешивают;
- чистое и сухое покровное стекло притирают к камере так, чтобы в месте соприкосновения образовались радужные кольца;
- кровь, разведенную в пробирке, хорошо перемешивают. Концом круглой стеклянной палочки отбирают каплю крови и подносят к краю шлифованного стекла камеры;
- после заполнения камеры ее оставляют на 1 мин в покое для оседания лейкоцитов;
- считают лейкоциты при малом увеличении (объектив ×8 или ×9, окуляр ×10 или ×15) при затемненном поле зрения (при опущенном конденсоре или суженной диафрагме);
- для получения удовлетворительных результатов подсчитывают лейкоциты в 100 больших квадратах.
Зная объем большого квадрата и степень разведения крови, находят количество лейкоцитов в 1 мкл и 1 л крови. Сторона большого квадрата равна 1/5 мм, площадь - 1/25 мм2, объем пространства над этим квадратом - 1/250 мм3.
Формула для подсчета лейкоцитов:
где В - количество лейкоцитов в 100 больших квадратах; П - степень разведения (20).
Норма: 4,0–9,0 × 109/Л
Увеличение количества лейкоцитов выше 9,0 × 109/л называется лейкоцитозом, уменьшение их числа ниже 4,0 × 109/л - лейкопенией. Однако даже 3,5 × 109 в 1 л лейкоцитов для ряда лиц может являться нормой. По данным литературы, у таких людей повышена иммунная сопротивляемость и они реже болеют, что, по-видимому, объясняется необходимостью для осуществления иммунных реакций наличия резерва лейкоцитов в тканях, где их в 50–60 раз больше, чем в кровяном русле. Очевидно, именно у здоровых лиц с низким содержанием лейкоцитов в периферической крови соответственно увеличены резервы их в тканях. Объясняют этот феномен наследственно-семейным характером или повышением влияния парасимпатической нервной системы.
Лейкопения может быть функциональной и органической. Функциональная лейкопения связана с нарушением регуляции кроветворения и наблюдается:
- при некоторых бактериальных и вирусных инфекциях (брюшной тиф, грипп, оспа, краснуха, болезнь Боткина, корь);
- при действии лекарственных препаратов (сульфаниламидов, анальгетиков, противосудорожных, антитиреоидных, цитостатических и других препаратов);
- при мышечной работе, введении чужеродного белка, нервных и температурных влияниях, голодании, гипотонических состояниях;
- ложная лейкоцитопения может быть связана с агрегацией лейкоцитов во время длительного хранения крови при комнатной температуре (более 4 ч).
Органическая лейкопения, возникающая в результате аплазии костного мозга и замещения его жировой тканью, бывает при:
- апластической анемии;
- агранулоцитозе;
- лейкопенической форме лейкоза;
- некоторых формах лимфогранулематоза;
- ионизирующем облучении;
- гиперспленизме (первичном и вторичном);
- коллагенозах.
Лейкоцитоз - это реакция кроветворной системы на воздействие экзогенных и эндогенных факторов. Различают физиологический и патологический лейкоцитоз.
Физиологический лейкоцитоз бывает:
- пищеварительный - после приема пищи, в особенности богатой белками; число лейкоцитов не превышает 10,0–12,0 × 109/л и через 3–4 часа возвращается к норме;
- при эмоциональном напряжении (выделение адреналина), тяжелой физической нагрузке, охлаждении, чрезмерном пребывании на солнце (солнечные ожоги), введении ряда гормонов (катехоламинов, глюкокортикостероидов и др.), во второй половине беременности, во время менструаций и обусловлен неравномерным распределением лейкоцитов в кровяном русле.
Патологический лейкоцитоз делится на абсолютный и относительный.
Абсолютный лейкоцитоз - повышение числа лейкоцитов в крови до нескольких сотен тысяч (100,0–600,0 × 109/л и более).
- Наиболее часто наблюдается при лейкозах: при хроническом лейкозе - в 98–100 % случаев, при острых лейкозах - в 50–60 %. Изменение соотношения клеток лейкоцитарного ряда в пунктате костного мозга и в крови служит основой диагностики лейкозов.
Относительный лейкоцитоз наблюдается:
- при острых воспалительных и инфекционных процессах, исключение составляют брюшной тиф, грипп, оспа, краснуха, бо лезнь Боткина, корь. Наибольший лейкоцитоз (до 70,0–80,0 × 109/л) отмечается при сепсисе;
- под влиянием токсических веществ (ядов насекомых, эндотоксинов), ионизирующей радиации (сразу после облучения);
- в результате действия кортикостероидов, адреналина, гистамина, ацетилхолина, препаратов наперстянки;
- при распаде ткани (некрозе), инфаркте миокарда, тромбозе периферических артерий с развитием гангрены, ожогах, экссудативном плеврите, перикардите, уремии, печеночной коме;
- значительных кровопотерях при ранениях, внутренних, гинекологических и других кровотечениях.
Повышение числа лейкоцитов при инфекционных заболеваниях в большинстве случаев сопровождается сдвигом лейкоцитарной формулы влево
Жив ли Христос? Воскрес ли Христос из мертвых? Исследователи изучают факты
dyagnoz.ru
4. Методика определения количества лейкоцитов.
Подсчет количества лейкоцитов крови может быть произведен в счетной камере Бюркера с сеткой Горяева или в электронно-автоматических анализаторах («Целлоскоп», «Культер», «Техникан»).
Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева
Принцип метода: аналогичен таковому подсчету эритроцитов, суть его состоит в точном отмеривании крови и ее разведении в определенном объеме жидкости с последующим подсчетом клеточных элементов в счетной камере и пересчете полученного результата на 1 крови.
Оборудование и реактивы:
смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов;
3% раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метилвиолета или метиленового синего;
Смеситель для лейкоцитов отличается от такового для эритроцитов тем, что имеет более широкий просвет капилляра и меньший по величине резервуар. На смеситель нанесены три метки: 0,5, 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в 10 либо в 20 раз (чаще разводят в 20 раз).
Ход исследования: при взятии крови для подсчета лейкоцитов с кожи предварительно удаляют ватным тампоном остатки крови и, слегка сдавливая палец, выпускают свежую каплю крови. При работе со смесителями кровь набирают до метки 0,5, затем разводят 3 % раствором уксусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в течение 3 мин, после чего сливают 1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками для подсчета лейкоцитов наливают 0,4 мл 3% раствора уксусной кисло ты и в нее выпускают 0,02 мл крови, отмеренной пипеткой от гемометра Сали. Тщательно встряхивают пробирки, затем в жидкость опускают пипетку и, набрав содержимое, заполняют счетную камеру. Так как лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов, то для получения достоверного и точного результата подсчет производят в 100 больших (неразграфленных) квадратах. Обычно в одном большом квадрате находится 1-2 лейкоцита. Число лейкоцитов в 1 мкл крови рассчитывается аналогично расчету числа эритроцитов по формуле
X = (А х 4000 х В)/Б,
где X - количество лейкоцитов в 1 мкл крови; А - количество лейкоцитов, сосчитанных в 1600 малых квадратах; Б - количество сосчитанных малых квадратов (1600); 4000 - величина, умножая на которую, мы получаем количество клеток в 1 мкл.
Интерпретация полученных данных. Нормальное количество лейкоцитов: 4.0 – 9.0 х 109/л. Уменьшение их числа в крови называется лейкопенией, увеличение - лейкоцитозом.
Лейкоцитоз может быть абсолютным (истинным) и относительным (перераспределительным).
Абсолютный лейкоцитоз – наблюдается при острых воспалительных процессах, некрозе тканей, острых бактериальных инфекциях (за исключением брюшного тифа, бруцеллеза, туляремии и др.), аллергических состояниях, злокачественных опухолях (с деструкцией тканей), закрытых травмах черепа и кровоизлияниях в мозг, диабетической и уремической коме, шоке, острой кровопотере, как первичная реакция – при лучевой болезни. Значительное повышение количество лейкоцитов встречается при лейкозах.
Относительный (перераспределительный) является следствием поступления лейкоцитов в ток крови из органов, служащих для нее депо. Это происходит после приема пищи (пищевой лейкоцитоз), горячих и холодных ванн, сильных эмоций (вегетососудистый лейкоцитоз), интенсивной мышечной работы (миогенный лейкоцитоз) и т.д.
Лейкопения. Лейкопения рассматривается как показатель угнетения функциональной способности костного мозга в результате воздействия токсических веществ (мышьяк, бензол и т.п.), некоторых медикаментов (сульфаниламиды, левомицетин, бутадион, иммуран, циклофосфан и т.п.), вирусов (гриппа, вирусного гепатита, кори и т.п.), микробов (брюшного тифа, бруцеллеза и т.п.), ионизирующей радиации, рентгеновского излучения и гиперспленизма (увеличение функции селезенки).
Лейкоцитоз и лейкопения редко характеризуются пропорциональным увеличением (снижением) суммарного числа лейкоцитов всех видов (например лейкоцитоз при сгущении крови); в большинстве случаев имеется увеличение (уменьшение) числа какого-либо одного типа клеток, поэтому применяют термины «нейтрофилез», «нейтропения», «лимфоцитоз», «лимфопения», «эозинофилия», «эозинопения», «моноцитоз», «моноцитопения», «базофилия».
При клинической оценке изменения количества лейкоцитов большое значение придается процентному соотношению отдельных форм лейкоцитов, то есть лейкоцитарной формуле.
Лейкоцитарная формула крови здорового человека:
Относительное количество Абсолютное количество
Базофилы……………………….0-1% 0-0,0650 х 109/л
Эозинофилы…………………….0.5-5% 0,02-0,30 х 109/л
Нейтрофилы: - миелоциты…………0% отсутствуют
Метамиелоциты……0% отсутствуют
Палочкоядерные…...1-6% 0,040-0,300 х 109/л
Сегментоядерные….47-72% 2,0-5,5 х 109/л
Лимфоциты……………………….19-37% 1,2-3,0 х 109/л
Моноциты………………………….3-11% 0,09-0,6 х 109/л
Подсчет лейкоцитарной формулы производят в окрашенных мазках периферической крови. Для правильной интерпрепатации результатов исследования лейкоцитарной формулы рекомендуется производить подсчет в абсолютных количествах, а не в относительных. Наиболее распространены методы окраски мазков по Романовскому-Гимзе, по Паппенгейму. Под иммерсией считают не менее 200 клеток, а затем выводят процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Анализ лейкограммы с учетом других показателей крови и клинической картины является ценным методом обследования, помогает в постановке диагноза и определении прогноза заболевания.
Основные причины нейтрофилеза.
Острые бактериальные инфекции – локализированные и генерализованные.
Воспаление или некроз ткани.
Миелопролиферативные заболевания.
Интоксикация.
Лекарственные воздействия (кортикостероиды).
Острые кровотечения.
Основные причины нейтропении.
Инфекции – бактериальные (брюшной тиф, бруцеллез, туляремия, паратифы) и вирусные (инфекционный гепатит, корь, грипп, краснуха и другие).
Миелотоксические влияния и супрессия гранулоцитопоэза (ионизирующая радиация; химические агенты – бензол, анилин, ДДТ; лекарственные воздействия – цитостатики и иммунодепрессанты; витамин-В12-фолиеводефицитная анемия, острый алейкемический лейкоз, апластическая анемия).
Воздействие антител (иммунные формы) – гиперчувтвительность к медикаментам, аутоиммунные заболевания (СКВ, ревматоидный артрит, хронический лимфолейкоз), изоиммунные проявления (гемолитическая болезнь новорожденных).
Перераспределение и депонирование в органах – шоковые состояния, заболевания со спленомегалией и гиперспленизмом.
Наследственные формы (семейная доброкачественная хроническая нейтропения).
Основные причины эозинофилии.
Аллергические заболевания.
Хронические поражения кожи - псориаз, пузырчатка, экзема.
Опухоли (эозинофильные варианты лейкоза).
Другие заболевания – фибропластический эндокардит Леффлера, скарлатина.
В фазе выздоровления при инфекциях и воспалительных заболеваниях (благоприятный прогностический признак).
Причины эозинопении (анэозинофилии).
Повышенная адренокортикостероидная активность в организме.
Брюшной тиф.
Основные причины базофилии:
Хронический миелолейкоз и эритремия.
Основные причины моноцитоза.
Подострые и хронические бактериальные инфекции.
Гемобластозы – моноцитарный лейкоз, лимфогранулематоз, лимфомы.
Другие состояния – СКВ, саркоидоз, ревматоидный артрит, инфекционный моноцитоз; в период выздоровления от инфекций, при выходе из агранулоцитоза, после спленэктомии.
Снижение числа моноцитов имеет значение главным образом при оценке лимфоцитарно-моноцитарного соотношения при легочном туберкулезе.
Основные причины лимфоцитоза.
Инфекции – острые вирусные (инфекционный мононуклеоз, корь, краснуха, ветряная оспа), хронические бактериальные (туберкулез, сифилис, бруцеллез), протозойные (токсоплазмоз).
Гемобластозы (лимфолейкоз, лимфомы).
Другие заболевания - гипертиреоз, аддисонова болезнь, витамин-В12-фолиево-дефицитная анемия, гипо- и апластические анемии.
Лимфоцитопения наблюдается при СКВ, лимфогранулематозе, распространенном туберкулезе лимфоузлов, в терминальной стадии почечной недостаточности, острой лучевой болезни, иммунодефицитных состояниях, приеме глюкокортикоидов.
Увеличение или уменьшение числа отдельных видов лейкоцитов в крови может быть относительным или абсолютным. Если изменяется только процентное содержание того или иного вида лейкоцитов, то имеет место относительная нейтрофилия, относительная эозинопения и т.д. Увеличение или уменьшение абсолютного содержания какого-либо вида лейкоцитов, то есть количества данных клеток в единице объема крови, называют абсолютной нейтрофилией, абсолютной эозинопенией и т.д.
Сдвиг формулы влево (увеличение количества молодых форм нейтрофилов) – признак воспаления или некротического процесса в организме.
Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо характерен для лучевой болезни и витамин-В12-фолиеводефицитной анемии.
Отсутствие или значительное снижение числа всех видов зернистых лейкоцитов – гранулоцитов (нейтрофилов, эозинофилов, базофилов) обозначают термином агранулоцитоз. В зависимости от механизма возникновения различают миелотоксический (воздействие ионизирующего излучения, прием цитостатиков) и иммунный (гаптеновый и аутоиммунный агранулоцитоз).
Роль лейкоцитов в организме
Лейкоциты крови выполняют в организме различные функции – защитную,
трофическую, тригерную. Нейтрофилы благодаря фагоцитарной активности и богатству
гидролитическими и другими ферментами осуществляют бактерицидную, вируцидную,
кандидоцидную и дезинтоксицирующую функции. Способность нейтрофилов к фагоцитозу
реализуется в микроциркуляторном русле (в капиллярах) при краевом стоянии,
особенно после выхода в ткань, при этом лейкоциты активно движутся к участкам
воспаления и тканевого распада, где находятся вредоносные агенты. Однако участие
нейтрофилов в воспалении не ограничивается фагоцитозом возбудителя. В настоящее
время известно, что нейтрофилы, содержащие в своих гранулах набор биологически
активных веществ (энзимной и неэнзимной природы), прямо или опосредовано (путем
взаимодействия с плазменными и тканевыми факторами) участвуют в развертывании
всех этапов воспаления. Нейтрофильным гранулоцитам принадлежит также ведущая
роль в образовании активных эндогенных пирогенов и формировании лихорадочной
реакции. Излияние гидролитических ферментов из нейтрофилов в межклеточную среду
(экзоцитоз) с последующим забором деградированного материала (эндоцитоз) имеет
немаловажное значение для жизнедеятельности соединительной ткани. Эозинофилы
(благодаря содержанию лактопероксидазы и других ферментов) обладают
дезинтоксицирующим свойством (их находят в большом количестве в тканевых
жидкостях, подслизистой оболочке кишечника, дыхательном аппарате и коже). Кроме
того, они участвуют в образовании плазминогена. Эозинофилия характерна для
аллергических состояний и объясняется, очевидно, адсорбированием ими гистаминных
продуктов. Базофилы содержат в своих гранулах гепарин, обладающий
противосвертывающим и антигиалуронидазным свойством, а также гистамин, что
позволяет им (наряду с тучными клетками) принимать участие в воспалительных и
аллергических реакциях. Моноциты способны к амебоидному движению и фагоцитозу.
Особенно активно они фагоцитируют остатки клеток, чужеродные мелкие тела,
малярийные плазмодии, микобактерии туберкулеза и могут захватывать даже крупные
клетки. Лимфоциты играют важную роль в процессах иммунитета. С точки зрения
современной иммунологии циркулирующие в крови лимфоциты неоднородны по своему
функциональному значению. Большую их часть составляют так называемые Т-лимфоциты
(тимусзависимые, прошедшие в развитии через тимус), меньшую – В-лимфоциты
(образующиеся непосредственно из стволовых клеток, минуя тимус). Т-лимфоцитам
приписывают участие в клеточном иммунитете. В-лимфоцитам – в
антителообразовании, то есть гуморальном иммунитете. Круглоклеточная
инфильтрация, нередко наблюдающаяся при воспалительных процессах (например,
туберкулезе), позволяет думать об участии лимфоцитов в борьбе с инфекцией. Кроме
того, лимфоциты осуществляют трофическую (репаративную) функцию на местах
тканевой деструкции и воспаления.
Продолжительность жизни лейкоцитов неодинакова. Полный цикл жизни гранулоцитов
составляет 9-13 дней, при этом на незрелые костномозговые стадии приходится 5-6
дней Внутрисосудистый период жизни короткий – от нескольких часов до 2 дней, так
как лейкоциты быстро уходят в ткани, где и осуществляются в основном их функции,
например, защитная (поэтому в тканях их примерно в 40-50 раз больше, чем в
кровяном русле). Лимфоциты делятся на коротко живущие (которые, видимо, обладают
свойством репродукции себе подобных) и длительно живущие – до 200-300 дней
(формы, сохраняющие иммунологическую «память»). В отличие от нейтрофилов,
которые после ухода в ткань, по-видимому, обратно в кровяное русло не
возвращаются, лимфоциты обладают способностью к рециркуляции.
Клиническое значение
Общее число лейкоцитов в среднем в 760 раз меньше числа эритроцитов. В норме
в 1 мкл крови взрослого человека содержится от 4000 до 9000 лейкоцитов. У
новорожденного количество лейкоцитов равно 12000-15000 в 1 мкл, к 5 годам оно
снижается до 10000, а с 10 лет устанавливается на том же уровне, что и у
взрослого.
Численность количества лейкоцитов в крови колеблется в течении дня, достигая
максимума в вечерние часы. Увеличение количества лейкоцитов в крови называается
лейкоцитозом, а уменьшение - лейкопенией. Изменение количества лейкоцитов имеет
значение тогда, когда оно значительно и обнаруживается повторно.
В основе лейкоцитоза могут лежать различные патофизиологические механизмы,
связанные с продукцией, созреванием и выселением лейкоцитов из кроветворных
органов, а также с их перераспределением в кровяном русле. Все эти факторы могут
комбинироваться или выявляться в отдельности. Различают абсолютный и
относительный (перераспределительный) лейкоцитоз.
Лейкоцитоз может наблюдаться у здоровых людей в зависимости от некоторых
физиологических моментов. Например:
1. после приема пищи, особенно богатой белком (при "пищеварительном" лейкоцитозе
число лейкоцитов обычно не превышает 10000-12000 в 1 мкл крови и через 3-4 часа
возвращается к норме),
2. после мышечной работы ("миогенный" лейкоцитоз может иногда достигать 20000),
3. горячих и холодных ванн в периоде реактивного расширения сосудов кожи,
4. беременности,
5. сильных эмоций (симпатико-вегетативные влияния).
Во всех этих случаях лейкоцитоз является распределительным, то есть возникает в
результате сосудистых реакций с выселением лейкоцитов из кровяных депо (однако в
основе их нередко лежит накопление в крови химических продуктов, например,
молочной кислоты). Лейкоцитоз может возникать при введении некоторых
фармакологических препаратов, например адреналина, а также кортикостероидов и
АКТГ. При этом общее количество лейкоцитов повышается до 15000-20000, что
объясняется миелотропным действием указанных гормонов. Это действие проявляется
в ускоренном созревании костномозговых клеток и выходом в кровь зрелых
лейкоцитов.
Лейкоцитоз характерен для следующих патологических состояний:
1. острых и хронических лейкозов, когда число лейкоцитов в 1 мкл крови может
достигать 500000-600000 и более за счет выплывания из органов кроветворения
патологически незрелых клеток;
2. острых инфекционных заболеваний (за исключением брюшного тифа, бруцеллеза),
большинства вирусных инфекций; воспалительных заболеваний (перикардит, крупозная
пневмания, экссудативный плеврит) и гнойных процессов (сепсиса, рожи, менингита,
перитонита). При острых инфекционных и воспалительных заболеваниях количество
лейкоцитов достигает 20-30 тысяч и больше. При гнойных процессах - до 30-40
тысяч в 1 мкл. Причиной лейкоцитоза в данных случаях является стимуляция
лейкопоэтической функции кроветворных органов в результате действия
специфических возбудителей и факторов воспаления. Подобная реакция носит
временный функциональный характер и обычно исчезает вместе с ликвидацией
инфекционного агента и воспалительного очага. Этим инфекционные лейкоцитозы (лейкемоидные
реакции) отличаются от лейкемий.
3. инфаркта миокарда, обширных ожогов, злокачественных опухолей и уремии. При
инфаркте миокарда лейкоцитоз не более 20000, во всех остальных случаях до 30000.
В этих случаях лейкощг оз является следствием реактивного возбуждения лейкопоэза
в ответ на тканевой распад и эндогенную интоксикацию.
4. воздействий экзогенных токсических веществ - мышьяковистого водорода,
нитробензола, угарного газа, а также действия ионизирующй радиации в ее первой
стадии. Лейкоцитоз в этих случаях может быть разной степени выраженности, но
чаще не более 20000.
5. значительных кровопотерь - ранений, внутренних кровотечений - лейкоцитоз
достигает значений 12-15 тысяч и называется постгеморрагическим.
6. шоковых, послеоперационных состояний и эпилепсии. Эти лейкоцитозы называются
нейро-гуморальными и относятся к кровораспределительным лейкоцитозам.
Возникновение лейкопений может быть связано с нарушением (торможением, угнетением) продукции созревания и выселения лейкоцитов из органов кроветворения, а также с их перераспределением в кровяном русле.
Наклонность к лейкопении (постоянной или циклической) отмечается у некоторых
здоровых людей и носит нередко наследственно-семейный характер, но может
зависеть от нейро-вегетативных (парасимпатических) влияний и воздействий внешней
среды (например, солнечной радиации). Понижение количества лейкоцитов отмечается
также
при голодании, упадке общего тонуса, во время глубокого сна.
Лейкопения характерна для следующих состояний:
1. бактериальных инфекций - брюшного тифа, бруцеллеза, затяжного септического
эндокардита, вирусных заболеваний (грипп, корь, краснуха, болезнь Боткина).
Количество лейкоцитов снижается до 3000 в 1 мкл крови, и зависит от угнетающего
действия некоторых токсинов на лейкопоэз. Появление лейкопении при инфекционных
заболеваниях, для которых характерен лейкоцитоз, свидетельствует о пониженной
иммунной сопротивляемости организма, что отмечается у стариков и истощенных лиц,
а также в случаях тяжелого течения заболевания.
2. различных спленомегалий с картиной гиперспленизма. "Гиперспленизм" -
функциональное понятие, которое отражает тормозящее действие увеличенной
повышенно функционирующей селезенки на костномозговое кроветворение. Оно
проявляется в задержке выхождения из костного мозга гранулоцитов, что создает
картину селезеночной гранулоцитопении, но может характеризоваться также
тромбоцитопенией, анемией, а при их сочетании - панцитопенией.
3. системной красной волчанкой и некоторых других аутоиммунных состояний. Число
лейкоцитов в активную фазу болезни колеблется от 4000 до 1000 в 1 мкл. Данная
лейкопения связана с образованием антител к собственным лейкоцитам.
4. различных типов агранулоцитоза. Агранулоцитоз - это клинико-гематологический
синдром, характеризующийся исчезновением нейтрофильных лейкоцитов в крови.
Существуют агранулоцитозы медикаментозные, токсические и алиментарно-
токсические (употребление в пищу испорченных перезимовавших зерновых).
5. гипопластических и апластических состояний кроветворения - врожденных и
приобретенных форм, характеризующихся жировым перерождением костного мозга с
частичной или тотальной редукцией кроветворения.
6. некоторых гемобластозов - алейкемических вариантов острого лейкоза. Последние
три группы лейкопений относятся к органическим и характеризуются снижением
количества лейкоцитов до 1000-800 и ниже в 1 мкл крови.
Способы определения количества лейкоцитов
1. Метод подсчета в камере Горяева. Взятие и разведение крови осуществляют
пробирочным методом. В пробирку вносят 0,4 мл разводящей жидкости и 0,02 мл
капиллярной крови. Полученное разведение 1:21 можно практически считать равным
1:20. В качестве разводящей жидкости обычно употребляют 3-5% раствор уксусной
кислоты, подкрашенной метиленовым синим (уксусная кислота лизирует эритроциты,
метиленовый синий окрашивает ядра лейкоцитов). Перед заполнением камеры Горяева
пробирку с разведенной кровью тщательно встряхивают. Камеру заполняют так, же
как для подсчета эритроцитов. Подсчет производят в 100 больших квадратах (неразграфленных).
Расчет числа лейкоцитов осуществляется по формуле: В х 4000 х 20/ 1600, где В –
количество лейкоцитов подсчитанных в камере. Практически для получения
действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл достаточно полученную при подсчете
сумму разделить пополам и приписать два нуля. При определении количества
лейкоцитов камерным методом ошибка составляет в среднем +7%.
2. Электронно-автоматический метод. Этот метод является более точным. Ошибка не
превышает обычно 2-3%. Кроме этого этот метод обеспечивает более масштабное
исследование.